分光光度法測量的理論依據(jù)是伯郎—比耳定律(Lambert-Beer law)：當(dāng)容液中的物質(zhì)在光的照射和激發(fā)下，產(chǎn)生了對(duì)光吸收的效應(yīng)。但物質(zhì)對(duì)光的吸收是有選擇性的，各種不同的物質(zhì)都有其各自的吸收光譜。所以根據(jù)定律當(dāng)一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時(shí)，溶液對(duì)光的吸光度值A(chǔ)與溶液的濃度C（g/l）或液層厚度L(cm)成正比。其定律表達(dá)式A=KCL（K是比例系數(shù)）。當(dāng)C的單位為mol/l時(shí)，比例系數(shù)用E表示，則A=ECL稱為摩爾吸光系數(shù)。其單位為L·mol-1·cm-1。它是有色物質(zhì)在一定波長下的特征常數(shù)。
①光源。光源的壽命有限，為了延長光源使用壽命，在不使用儀器時(shí)不要開光源燈，應(yīng)盡量減少開關(guān)次數(shù)。在短時(shí)問的工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。剛關(guān)閉的光源燈不能立即重新開啟。儀器連續(xù)使用時(shí)間不應(yīng)超過3h。若需長時(shí)間使用，建議間歇30min。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附。若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。
?、趩紊?。單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)，不能拆開。選擇波長應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動(dòng)，不可用力過猛。為防止色散元件受潮生霉，必須定期更換單色器盒干燥劑(硅膠)。若發(fā)現(xiàn)干燥劑變色，應(yīng)立即更換。
?、畚粘?。必須正確使用吸收池，應(yīng)特別注意保護(hù)吸收池的兩個(gè)光學(xué)面。
?、軝z測器。光電轉(zhuǎn)換元件不能長時(shí)間曝光，且應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。
?、莓?dāng)儀器停止工作時(shí)，必須切斷電源。
?、逓榱吮苊鈨x器積灰和沾污，在停止工作時(shí)，應(yīng)蓋上防塵罩。
⑦儀器若暫時(shí)不用要定期通電，每次不少于20～30min，以保持整機(jī)呈干燥狀態(tài)，并且維持電子元器件的性能。
超微量分光光度計(jì)應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要0.5~2ul，在檢測臺(tái)上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細(xì)管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點(diǎn)。
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